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高压均质法提取药用真菌多糖的研究

[导读]真菌多糖是一类重要的生物活性物质,具有多种功效,开展真菌多糖的分离提取研究,是进行后续产品开发的基础。

真菌多糖是一类重要的生物活性物质,目前相关研究主要集中于真菌多糖的分离提取、含量分析检测、物质结构解析、药理活性评价等领域。然而,已报道的真菌多糖仍然多为杂多糖,深入研究具有一定困难,另外,真菌的生长环境、提取制备工艺的不同也会影响到多糖的结构及其生物活性。目前尽管已有多种真菌多糖应用于临床,但质量及品质不易控制,药效重复性偏低,与国际规范标准有一定差距,严重限制了真菌多糖在医药行业的广泛应用。开展真菌多糖的提取工艺研究,是进行产品开发的基础。猴头菌及其多糖在医药、生物、保健、食品、美容等工业中具有极具潜力的研究价值和应用前景,市场需求也逐年增加,因此作者对猴头菌多糖的分离提取工艺进行了探索性研究。


种提取方法所得猴头多糖的比较1)高压均质法。准确称量 20 g 猴头菌丝体加入300 mL ddH 2 O 中,采用 Panda Plus 2000 高压均质机在最优条件下进行均质破碎,操作压力设定为 80 MPa,均质次数设置为 3 次,通过循环冷凝水进行温度控制;高压均质结束后,在冷冻离心机中 8000 r/min 的离心条件下离心 10 min,将上清液在 50℃条件下减压浓缩后,按照体积比 1 ∶ 3 加入无水酒精,在 4℃ 过夜处理,沉淀在冻干机上经冷冻干燥收获猴头菌 H. erinaceus胞内多糖。


2)超声提取法。准确称量 20 g 猴头菌丝体加入300 mL ddH 2 O 中,在冰浴条件下进行细胞破碎。仪器:新芝 JY92-II 超声破碎仪,功率 200 W,操作周期 40min(其中运行10 s 停5 s)。经镜检确认细胞充分破裂后,在离心机中设置 8000 r/min 离心 10 min,浓缩液按照体积比 1 ∶ 3 加入无水酒精,于 4℃醇沉过夜,再经冻干处理后收集多糖样品。


3)热水提取法。称取猴头发酵菌丝体 20 g,按照1 ∶ 15 的料液比加入 ddH 2 O 中,在 90℃ 的热水浴中温浴 2 h,并提取 2 次,将 2 次水浴后的上清进行合并,在50℃条件下减压浓缩,获得的浓缩液按照体积比 1 ∶ 3加入无水酒精,经 4℃过夜处理,沉淀冷冻干燥后得猴头菌 H. erinaceus 胞内多糖。



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